Ultra Nuclease GMP klases
Kaķa Nr.: HC2016A
UltraNuclease GMP pakāpe tiek ekspresēta un attīrīta Escherichia coli (E.coli), ģenētiski modificēta un sagatavota GMP vidē.Tas var samazināt šūnu supernatanta un šūnu lizāta viskozitāti zinātniskos pētījumos, palielināt olbaltumvielu attīrīšanas efektivitāti un uzlabot olbaltumvielu funkcionālo izpēti.Produkts var arī samazināt saimnieka nukleīnskābju atlikumus līdz pg pakāpei, uzlabojot bioloģisko produktu veiktspēju un drošību lietojumos, tostarp vīrusu attīrīšanā, vakcīnu ražošanā un olbaltumvielu/polisaharīdu farmācijas ražošanā.Turklāt produktu var lietot arī, lai novērstu cilvēka perifēro asiņu mononukleāro šūnu (PBMC) salipšanu šūnu terapijā un vakcīnu izstrādē.
UltraNuclease tiek nodrošināts sterilizēta reaģenta veidā, kas eluēts buferšķīdumā (20 mM Tris-HCL pH 8,0, 2 mM MgCl, 20 mM NaCl, 50% glicerīns) ar bezkrāsaina, caurspīdīga šķidruma izskatu.Šis produkts ir ražots saskaņā ar GMP procesa prasībām un tiek nodrošināts šķidrā veidā.
Sastāvdaļas
UltraNuclease GMP pakāpe (250 U/μL)
Uzglabāšanas apstākļi
Produkts tiek piegādāts kopā ar sauso ledu, un to var uzglabāt -25℃~-15°C temperatūrā divus gadus.
Ja produkts ir atvērts un uzglabāts 4℃ temperatūrā ilgāk par nedēļu, iesakām filtrētproduktu, lai novērstu mikrobu piesārņojumu.
Specifikācijas
| Izteiksmes resursdators | Rekombinantā E. coli ar UltraNuclease gēnu |
| Molekulārais svars | 26,5 kDa |
| soelektriskais punkts | 6.85 |
| Tīrība | ≥99% (SDS-PAGE) |
| Uzglabāšanas buferis | 20 mM Tris-HCL pH 8,0, 2 mM MgCl, 20 mM NaCl, 50% glicerīna |
|
Vienības definīcija | Vienas aktivitātes vienības (U) definīcija ir izmantotais fermenta daudzumsmainiet ΔA260 absorbcijas vērtību par 1,0 30 minūtēs 2, 625 mlreakcijas sistēma 37 ℃ ar pH 8,0 (ekvivalents pilnīgai šķelšanai37 μg laša spermas DNS oligonukleotīdos). |
Instrukcijas
1. Paraugs Kolekcija
Adherent šūnas: noņemiet barotni, mazgājiet šūnas ar PBS un noņemiet supernatantu.
Suspensijas šūnas: savāc šūnas, centrifugējot, mazgā šūnas ar PBS, centrifugē pie 6000apgr./min 10 min, savāc granulu.
Escherichia coli: savāc baktērijas, centrifugējot, vienu reizi mazgā ar PBS, centrifugē pie 8000apgr./min 5 minūtes un savāc granulu.
2. Parauga apstrāde
Apstrādājiet savāktās šūnu granulas ar līzes buferšķīdumu masas (g) un tilpuma (mL) attiecībā 1: (10-20), vai ar mehāniskām vai ķīmiskām metodēm uz ledus vai istabas temperatūrā (1 g šūnu granulu satur apm.
109 šūnas).
3. Enzīmu apstrāde
Pievienojiet reakcijas sistēmai 1-5 mM MgCl un noregulējiet pH līdz 8-9.
Pievienojiet UltraNuclease atbilstoši attiecībai 250 vienības, lai sagremotu 1 g šūnu granulu, inkubējiet 37 ℃ temperatūrā ilgāk par 30 minūtēm.Lūdzu, skatiet veidlapu “Ieteicamais reakcijas laiks”, lai izvēlētosārstēšanas ilgums.
4. Supernatants Kolekcija
Centrifugējiet ar ātrumu 12 000 apgr./min 30 minūtes un savāciet supernatantu.
Piezīme: Ja šķīdums ir skābs vai sārmains vai satur lielu sāļu, mazgāšanas līdzekļu koncentrāciju vaidenaturantiem, lūdzu, palieliniet enzīma devu vai attiecīgi pagariniet ārstēšanas laiku.
Ieteicamie reakcijas apstākļions
| Parametrs | Optimālais stāvoklis | Efektīvs kondicionieris |
| Mg²+Koncentrācija | 1-5 mM | 1-10 mM |
| pH | 8-9 | 6-10 |
| Temperatūra | 37℃ | 0-42℃ |
| DTT koncentrācija | 0-100 mM | > 0 mM |
| Merkaptoetanola koncentrācija | 0-100 mM | > 0 mM |
| Vienvērtīgā katjona koncentrācija | 0-20 mM | 0-150 mM |
| Fosfāts lon Koncentrācija | 0-10 mM | 0-100 mM |
Ieteicams Reakcija Laiks (37℃, 2 mM Mg²+, pH 8.0)
| UltraNuclease daudzums (galīgā koncentrācija) | Reakcijas laiks |
| 0,25 U/ml | >10 h |
| 2,5 U/ml | > 4h |
| 25 U/ml | 30 min |
Piezīmes:
Lūdzu, valkājiet nepieciešamos IAL, piemēram, laboratorijas mēteli un cimdus, lai nodrošinātu savu veselību un drošību!
