Multiplex One Step RT-qPCR premikss
Apraksts
Kaķa Nr.: HCR5141A
Multiplex One Step RT-qPCR premikss ir multiplekss kvantitatīvs PCR komplekts, kura pamatā ir RNS kā veidne.Eksperimentā vienā reakcijas mēģenē tiek veikta reversā transkripcija un kvantitatīvā PCR, kas vienkāršo eksperimentālo darbību un samazina piesārņojuma risku.Unikālo bufera un enzīmu maisījuma dizainu var izmantot vienpakāpes liofilizētā sistēmā.Komplektā tiek izmantota karstumizturīga reversā transkriptāze efektīvai pirmās ķēdes cDNS sintēzei, izmantojot karstās palaišanas Taq DNS polimerāzi kvantitatīvai amplifikācijai.Tas satur optimizētu reakcijas buferi, enzīmu maisījumu utt., un tika pievienoti faktori, kas efektīvi kavē nespecifisku PCR amplifikāciju un uzlabo vairāku qPCR reakciju amplifikācijas efektivitāti, ļaujot veikt daudzkārtēju fluorescences kvantitatīvo amplifikāciju, vienlaikus nodrošinot praimeru amplifikācijas efektivitāti.
Sastāvdaļas
| Vārds |
| 1. Lio-buferis |
| 2. Lio-enzīmu maisījums |
| 3. Lio aizsarglīdzeklis |
Transporta nosacījumijonu
A: Lio buferis un aizsarglīdzeklis: -25 ~ -15 ℃, glabāšanas laiks ir 1 gads.
B: Lio-enzīmu maisījums, 2-8 ℃, glabāšanas laiks ir 6 mēneši.
Instrukcija darbībai
1. Reakcijas sistēma (kā piemēru ņemiet 25 μL)
| Sastāvdaļas | Tilpums (μL) | Galīgā koncentrācija |
| Lyo-buferis | 6 | 1* |
| Lio-enzīmu maisījums | 1 | - |
| Lio-aizsargs | 8 | - |
| Gruntēšanas maisījums (10 μM) | 1 | 0,1–1 uM |
| Zondes maisījums (10 μM) | 0.5 | 0,05-0,5 uM |
| RNS veidne | 5 | - |
| DEPC H2O | Līdz 25 | - |
2. Optimizēts riteņbraukšanas protokols
1) Standarta riteņbraukšanas protokols
| Reakcijas stadija | Temperatūra | Laiks | Cikls | |
| 1 | Reversā transkripcija | 50°Ca | 10 min | 1 |
| 2 | Sākotnējā denaturācija | 95°C | 5 min | 1 |
| 3 | Pastiprināšanas reakcija | 95°C | 15 sek | 45 cikli |
| 60°Cb | 30 sekc |
2) Ātrā riteņbraukšanas protokols
|
| Reakcijas stadija | Temperatūra | Laiks | Cikls |
| 1 | Reversā transkripcija | 50°Ca | 2 min | 1 |
| 2 | Sākotnējā denaturācija | 95°C | 2 sek | 1 |
| 3 | Pastiprināšanas reakcija | 95°C | 1 sek |
45 cikli |
| 60°Cb | 13 sekc |
Piezīme:
a) Reverss transkripcija: Temperatūra var izvēlēties 42°C vai 50°C uz 10-15 minūtēm.
b) Pastiprināšanas reakcija: Temperatūra tiek regulēta atbilstoši projektēto gruntskrāsu Tm vērtībai.
c)Fluorescence signāls iegūšana: Lūdzu, iestatiet eksperimentālo procedūru atbilstoši prasībāminstrumenta rokasgrāmata.
Tehniskā informācija/specifikācijas
| Karstais starts | Iebūvēts karstais starts |
| Atklāšanas metode | Primer-zondes noteikšana |
| PCR metode | Viena soļa RT-qPCR |
| Parauga veids | RNS |
Piezīmes
1. Šis produkts ir paredzēts tikai izpētei.
2. Lūdzu, valkājiet nepieciešamos IAL, piemēram, laboratorijas mēteli un cimdus, lai nodrošinātu savu veselību un drošību!
