Bst 2.0 DNS polimerāze (bez glicerīna, augsts blīvums)
Bst DNS polimerāze V2 ir iegūta no Bacillus stearothermophilus DNS polimerāzes I, kurai ir 5′→3′ DNS polimerāzes aktivitāte un spēcīga ķēdes aizstāšanas aktivitāte, bet nav 5′→3′ eksonukleāzes aktivitātes.Bst DNS polimerāze V2 ir ideāli piemērota virkņu pārvietošanai, izotermiskai amplifikācijai LAMP (cilpas mediēta izotermiska amplifikācija) un ātrai sekvencēšanai.Šī Bst DNS polimerāze V2 spēj inhibēt DNS polimerāzes aktivitāti istabas temperatūrā, lai to varētu darbināt un reakcijas sistēmu var formulēt istabas temperatūrā, novēršot nespecifisku amplifikāciju un uzlabojot reakcijas efektivitāti, un šī versija var būt liofilizētam.Turklāt tas spēj atbrīvot savu aktivitāti paaugstinātā temperatūrā, tādējādi novēršot vajadzību pēc atsevišķa aktivizācijas posma.
Sastāvdaļas
| Komponents | HC5007A-01 | HC5007A-02 | HC5007A-03 |
| Bst DNS polimerāze V2 (bez glicerīna) (32 U/μL) | 0,05 ml | 0,25 ml | 2,5 ml |
| 10 × HC Bst V2 buferis | 1,5 ml | 2 × 1,5 ml | 3 × 10 ml |
| MgSO4 (100 mM) | 1,5 ml | 2 × 1,5 ml | 2 × 10 ml |
Lietojumprogrammas
1.LAMP izotermiskā pastiprināšana
2.DNS virknes vienas pārvietošanas reakcija
3.Augsta GC gēnu sekvencēšana
4.DNS sekvencēšana nanogramu līmenī.
Uzglabāšanas stāvoklis
Transportēšana zem 0°C un jāuzglabā -25°C~-15°C.
Vienības definīcija
Viena vienība ir definēta kā fermenta daudzums, kas 30 minūtēs 65 °C temperatūrā iekļauj 25 nmol dNTP skābē nešķīstošā materiālā.
LAMPAS reakcija
| Sastāvdaļas | 25 μLSistēma |
| 10 × HC Bst V2 buferis | 2,5 μL |
| MgSO4 (100 mM) | 1,5 μL |
| dNTP (katrs 10 mM) | 3,5 μL |
| SYTO™ 16 Green (25×)a | 1,0 μL |
| Grunts maisījumsb | 6 μL |
| Bst DNS polimerāze V2 (bez glicerīna) (32 U/ul) | 0,25 μl |
| Veidne | × μL |
| ddH₂O | Līdz 25 μL |
Piezīmes:
1) a.SYTOTM 16 Green (25×): atbilstoši eksperimentālām vajadzībām kā aizstājējus var izmantot citas krāsvielas;
2) b.Primer maisījums: iegūts, sajaucot 20 µM FIP, 20 µM BIP, 2,5 µM F3, 2,5 µM B3, 5 µM LF, 5 µM LB un citus tilpumus.
Reakcija un stāvoklis
1 × HC Bst V2 buferšķīdums, inkubācijas temperatūra ir no 60°C līdz 65°C.
Siltuma inaktivācija
80°C, 20 min.
