Peroksidāze (mārrutku avots) Sinonīms: Ūdeņraža peroksīda oksidoreduktāze;HRP
Apraksts
Mārrutku peroksidāze (HRP) ir izolēta no mārrutku (Amoracia rusticana) saknēm un pieder pie feroprotoporfirīna peroksidāžu grupas.HRP viegli savienojas ar ūdeņraža peroksīdu (H2O2).Iegūtais [HRP-H2O2] komplekss var oksidēt dažādus ūdeņraža donorus:
Donors + H2O2 → Oksidēts donors + 2 H2O
HRP oksidēs dažādus substrātus (skat. 1. tabulu):
• Hrogēnas
• Ķīmiluminiscējošs (piemēram, luminols vai izoluminols)
• Fluorogēns (piemēram, tiramīns, homovanilskābe vai 4-hidroksifeniletiķskābe)
HRP ir vienas ķēdes polipeptīds, kas satur četrus disulfīda tiltus.HRP ir glikoproteīns, kas satur 18% ogļhidrātu.Ogļhidrātu sastāvs sastāv no galaktozes, arabinozes, ksilozes, fukozes, mannozes, mannoamīna un galaktozamīna atkarībā no konkrētā izoenzīma.
HRP ir plaši izmantota imūnglobulīnu etiķete daudzos dažādos imūnķīmijas lietojumos, ieskaitot imūnblotēšanu, imūnhistoķīmiju un ELISA.HRP var konjugēt ar antivielām ar vairākām dažādām metodēm, ieskaitot glutaraldehīdu, perjodātu oksidēšanu, izmantojot disulfīda saites, kā arī ar aminoskābju un tiola virzītu šķērssaistītāju palīdzību.HRP ir vispiemērotākā antivielu marķējums, jo tā ir mazākā un stabilākā no trim populārākajām enzīmu iezīmēm (peroksidāze, β-galaktozidāze, sārmaina fosfatāze), un tās glikozilācija samazina nespecifisko saistīšanos.Ir publicēts glutaraldehīda un periodāta konjugācijas metožu pārskats.
Peroksidāzi izmanto arī glikozes4 un peroksīdu noteikšanai šķīdumā.Vairākās publikācijās, 6–24 tēzēs, 25–29 un disertācijās 30–46 ir minētas P8375 izmantošana savos pētījumu protokolos.
Ķīmiskā struktūra
Specifikācija
Pārbaudes preces | Specifikācijas |
Apraksts | Sarkanbrūns amorfs pulveris, liofilizēts |
Aktivitāte | ≥100V/mg |
Tīrība (SDS-PAGE) | ≥90% |
Šķīdība (10mg pulveris/ml) | Skaidrs |
Fermentus saturoši | |
NADH/NADPH oksidāze | ≤0,1% |
Katalāze | ≤0,005% |
ATPāze | ≤0,03% |
Transportēšana un uzglabāšana
Transports:Piegādāts zem 2-8°C
Uzglabāšana:Uzglabāt -20°C (ilgtermiņā), 2-8°C (īstermiņā)
Ieteicams veikt atkārtotu pārbaudiDzīve:2 gadi