2 × PCR galvenais maisījums (bez krāsvielas)
PCR Master Mix ir sava veida parasts PCR iepriekš sajaukts šķīdums, kas ir gatavs lietošanai, ieskaitot Taq DNS polimerāzi, dNTP maisījumu MgCl2 un optimizētu buferi.Reakcijas laikā pastiprināšanai var pievienot tikai grunti un šablonu, kas ievērojami vienkāršo eksperimenta darbības posmus.Šis produkts satur lieliskus stabilizatorus, un to var uzglabāt 3 mēnešus 4 ℃ temperatūrā.PCR produktam ir 3′-dA izvirzījums, un to var viegli klonēt T vektorā.
Uzglabāšanas apstākļi
Produkts jāuzglabā -25℃ ~ -15℃ divus gadus.
Specifikācijas
| Uzticība (pret Taq) | 1× |
| Karstais starts | No |
| Pārkare | 3′-A |
| Polimerāze | Taq DNS polimerāze |
| Reakcijas formāts | SuperMix vai Master Mix |
| Reakcijas ātrums | Standarta |
| Produkta veids | PCR galvenais maisījums (2×) |
Instrukcijas
1.Reakcijas sistēma
| Sastāvdaļas | Izmērs (μL) |
| Veidnes DNS | Piemērots |
| Primer 1 (10 μmol/L) | 2 |
| Primer 2 (10 μmol/L) | 2 |
| PCR galvenais maisījums | 25 |
| ddH2O | Līdz 50 |
2.Pastiprināšanas protokols
| Cikla soļi | Temperatūra (°C) | Laiks | Cikli |
| Iepriekšēja denaturācija | 94 ℃ | 5 min | 1 |
| Denaturācija | 94 ℃ | 30 sek | 35 |
| Atkausēšana | 50-60 ℃ | 30 sek | |
| Pagarinājums | 72 ℃ | 30–60 sek/kb | |
| Pēdējais pagarinājums | 72 ℃ | 10 minūtes | 1 |
Piezīmes:
1) Veidņu lietojums: 50-200 ng genoma DNS;0,1-10 ng plazmīdas DNS.
2) Mg2+koncentrācija: Šis produkts satur 3 mM MgCl2, kas piemērots lielākajai daļai PCR reakciju.
3) Atkausēšanas temperatūra: lūdzu, skatiet gruntskrāsu teorētisko Tm vērtību.Atkausēšanas temperatūru var iestatīt uz 2-5 ℃ zemāku par grunts teorētisko vērtību.
4) Pagarinājuma laiks: molekulārajai identifikācijai ieteicams 30 s/kb.Gēnu klonēšanai, 60s/kb ieteicams.
Piezīmes
1.Jūsu drošībai un veselībai, lūdzu, valkājiet laboratorijas mēteļus un vienreizējās lietošanas cimdus.
2.Tikai izpētei!
